微生物的生长
书接上回,这回学习下微生物的生长(Microbial Growth)。
1、原核生物的细胞周期 The Procaryotic cell cycle
大多数原核生物通过二分裂(binary fission)进行繁殖,还有一些原核生物是通过出芽、破碎和其他方式进行繁殖的。细胞周期中有两条途径起作用:一条是将 DNA 复制并分配到子代细胞中,另一条是进行胞质分裂 (Cytokinesis)。下图为二分裂过程:
2、生长曲线 Growth Curve
生长曲线(Growth Curve)在生物学中被广泛用于显示种群规模及生物量,个体身高及其生物量等数量随时间变化的关系。生长曲线有四个不同的阶段,分别为:迟滞期(Lag Phase ),对数生长期(exponential phase或log phase),稳定期(Stationary Phase)和衰亡期(Death phase)
迟滞的原因,可能是老化,耗尽了 ATP;对数生长期,微生物生长速率最快、代谢旺盛;在稳定期,垂死细胞的数量等于分裂细胞的数量,生长达到一个平台期;衰亡期时,活细胞数量呈指数下降。
3、微生物生长的测量
为了跟踪微生物种群数量或质量,测量微生物的生长以确定生长速率和世代时间。这就需要对微生物生长的情况进行测量。测量的方法很多,这里简要的说说一些测量办法。比如用分光光度计测量细胞质量,用计数板(Counting Chamber)来对细胞数进行测量。
4、微生物连续培养 Continuous culture
上面说的微生物生长曲线就是在封闭系统内监测而做出来的,然而,工业和实验都需要一个开放的系统,这个系统是具有通过持续提供营养同时也看可以去除废物来维持恒定的环境条件的系统。这个系统主要分为恒化器(Chemostat)和恒浊器 (Turbidostat)
恒化器和恒浊器都是开放式的连续培养系统,它们中最大的区别在于,恒化器是通过控制培养基的流速决定,而恒浊器是通过监测培养罐中微生物的浓度,调节流加物流速,使微生物细胞的浓度维持恒定。
5、影响微生物生长的环境因素
渗透浓度(osmotic concentration)以前被称为渗透压(osmolarity),微生物生长环境中的溶液是高渗溶液,水就会从细胞中流出。相反的,道理也一样。高渗环境中的细胞脱水可能会损坏细胞膜并导致细胞变得代谢不活跃。但一些微生物可以适应极端的高渗环境,比如嗜盐菌在NaCl或其他盐浓度高于 0.2M的情况下良好的生长。
微生物学家通常使用水活度 (Water Activity)来表达可用水的程度,溶液的水分活度是溶液相对湿度的 1/100(以百分比表示)。它也相当于溶液的蒸气压 (P1) 与纯水的蒸气压 (P0) 之比,水分活度与渗透压成反比。
常见的一些食品的水分活度,比如,熟肉、面包:0.91~0.98,酱油:0.80,干果:0.60-0.65,饼干、巧克力<0.60,这就是为什么干燥食物或添加大量盐和糖对防止食物变质如此有效的原因。
很多微生物对PH值都有一定的耐受范围,但它们耐受程度毕竟有限。细胞质 pH 值的剧烈变化会破坏质膜或抑制酶和膜转运蛋白的活性,从而损害微生物。如果内部 pH 值下降到远低于5或5.5,大多数原核生物就会死亡。
C、温度
微生物特别容易受到温度的影响,因为它们的温度会随着外部环境的温度而变化。而温度对生长影响的最重要因素是酶催化反应的温度敏感性,因为每种酶都有一个发挥最佳功能的温度。不同的生物,具有不同的基本温度(cardinal temperatures),它包括了生长的最低、最佳和最高温度。
不同微生物的基本温度差异很大,最适合的温度范围通常为 0~75°C之间,而微生物可以在-20~120°C 的范围内生长。已经发现,一些古细菌甚至可以在 121°C下生长。
D、氧的浓度
根据微生物中和需求氧的浓度的关系,可以将微生物分为5种类型,下图每个点代表单个细菌菌落:
而对于厌氧菌,可以通过一些几种办法,去除氧气:a、使用类似半胱氨酸的还原剂消除氧气;b、用真空泵抽走,同时,用氮气补充冲洗;c、在实验室这样的小量环境时,可以使用类似的GasPak厌氧系统,反应去除;d、只是小样品使用时,可以使用专门的厌氧袋。
E、压力
陆地上和水面上的生物总是受到 1 个大气压 的压力,并且不会受到压力的显着影响。但海底的很多原核生物,很多都是耐压的,像海参类动物(海参)肠道中的一些原核生物是嗜压的,它们在高压下生长得更快。而有些生物,无法在低于400个大气压下生长。
F、辐射
所有细胞都容易受到辐射造成的损害,辐射以其短波长和高能量对 DNA产生不利影响。像电离辐射中的X射线和伽马射线,会引起细胞DNA 的突变和破坏。而紫外线(UV)辐射也会通过将相邻的胸腺嘧啶碱基附着在DNA链上而对DNA造成损害。最致命的紫外线辐射波长为260nm,这是DNA最有效吸收的波长。
6、整个环境对微生物生长的影响
a、环境因素对生长的限制
李比希最低限度定律(木桶定律)指出,生物体的总生物量将由相对于生物体需求的最低浓度存在的养分决定。配图是植物的,效果等同。
为了应对营养的缺乏和竞争,许多生物体的形态通常会发生变化,以增加其表面积和吸收养分的能力。这些变化可以是周期性的,也可以是零星的,以响应不断变化的条件、其他生物体的竞争、养分过于丰富和枯竭等。
b、生物膜 Biofilms
生物膜是一些微生物细胞由自身产生的胞外聚合物所包围而形成,且附着在浸有液体的惰性或生物表面的,具有结构的群落。生物膜在自然界中,几乎无处不在。比如水底的石头上的生物膜,它是颗粒、真菌、细菌和藻类的混合物,在生物膜中,微生物可以免受许多侵害,例如紫外线、抗生素和其他抗菌剂。
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